У середні століття робилися неодноразові спроби переливання крові від тварин людині і від людини людині. Однак практично всі вони закінчувалися трагічно. Перше вдале переливання людської крові потерпілому справив 1667 році лікар Дені. Причини важких ускладнень, що виникають при гемотрансфузіях, першим встановив в 1901 році Карл Ландштейнер. Він змішував краплі крові різних людей і виявив, що в ряді випадків відбувається склеювання еритроцитів - аглютинація і їх подальший гемоліз. На підставі своїх дослідів Ландштейнер зробив висновок, що в еритроцитах є білки-агглютіногени, що сприяють їх склеюванню. Він виявив 2 агглютиногена А і В. На підставі їх відсутності або наявності в еритроцитах розділив кров на I, II і III групи. У 1903 р його учень Адріано Штурлі виявив IV групу крові. Пізніше в плазмі крові були виявлені білки, які взаємодіють з агглютиногенами і викликають склеювання еритроцитів. Їх назвали агглютининами a і b. Зараз встановлено, що антигенними властивостями володіє мембранний гликопротеид еритроцитів - гликофорин. Аглютиніни є імуноглобулінами M і G, тобто g-глобуліни. Агглютіноген А і агглютинин a, а також агглютиноген В і агглютинин b називають однойменними. При їх взаємодії відбувається склеювання еритроцитів. Тому в крові людини знаходяться тільки різнойменні агглютіногени і аглютиніни. У крові новонароджених агглютінінов немає. Однак потім компоненти їжі, речовини що виробляються мікрофлорою кишечника, сприяють синтезу тих агглютінінов, яких немає в еритроцитах даної людини.

Групи крові системи АВО позначаються римськими цифрами і дублюючим назвою антигену:

I (0) - в еритроцитах немає агглютиногенов, але в плазмі містяться аглютиніни a і b.

II (A) - агглютіногени А і аглютиніни b.

III (B) - агглютіногени В і аглютиніни a.

IV (AB) - в еритроцитах агглютіногени А і В, аглютинінів в плазмі немає.

В даний час виявлено, що в еритроцитах I групи є слабкий H-антиген. Агглютіногени А діляться на підтипи А1 і А2. Перший підтип зустрічається у 80% людей і володіє більш вираженими антигенними властивостями. Реакцій при переливанні між кров'ю цих підгруп не відбувається.

Спадкування групи крові здійснюється за рахунок генів А, В і О. В хромосомах людини міститься 2 з них. Гени А і В є домінантними. Тому у батьків з II і III групою крові дитина може мати будь-яку з 4-х груп.

3.ОА + ОВ = ВО

У 1940 році К. Ландштейнер і І. Вінер виявили в еритроцитах ще один агглютиноген. Вперше він був знайдений в крові макак-резусів. Тому був названий ними резус-фактором.

В даний час допускається переливання тільки одногруппових крові за системою АВО. Для визначення групової приналежності, краплю досліджуваної крові змішують на предметному склі з краплею стандартних сироваток I, II і III груп. Таким методом визначаються антигенні властивості еритроцитів. Якщо в жодній з сироваток не відбулася аглютинація, отже в еритроцитах агглютиногенов немає. Це кров I групи. Коли аглютинація спостерігається з сироватками I і III груп, значить еритроцити досліджуваної крові містять агглютиноген А. Тобто це кров II групи. Аглютинація еритроцитів з сироватками I і II груп говорить про те, що в них є агглютиноген В і ця кров III групи. Якщо у всіх сироватках спостерігається аглютинація, значить еритроцити містять обидва антигени А і В. Тобто кров IV групи. Добре було б проводити дослідження і з сироваткою IV групи. Більш точно групу крові можна визначити за допомогою стандартних еритроцитів I, II, III і IV груп. Для цього їх змішують з сироваткою досліджуваної крові і визначають зміст в ній агглютінінов. Резус приналежність крові визначають шляхом її змішування з сироваткою, що містить резус-аглютиніни.

Крім цього, щоб уникнути помилки при визначенні групи крові і

наявності D-антигену, застосовують пряму пробу. Вона необхідна і для виявлення несумісності крові за іншими антигенними ознаками. Пряму пробу виробляють шляхом змішування еритроцитів донора з сироваткою реципієнта при 37 0 С. При негативних результатах перші порції крові переливаються дрібно.

Алгоритм дій при визначенні групи крові і резус-фактора
при надходженні жінки в пологовий будинок

Визначення групи крові системи АВ0 моноклональними антитілами

підготувати:

• сухе предметне скло (типову тарілочку) для визначення групи крові;
• цоліклони анти-А ( рожевого кольору) І анти-В (синього кольору);
• дві піпетки для взяття Цоліклони з флаконів;
• дві скляні палички для змішування крові пацієнтки з Цоліклони;
• одноразовий шприц (на 5-10 мл) з голкою для взяття крові з вени пацієнтки;
• в стерильний лоток покласти 3 кульки, змочених спиртом, 2-3 стерильні серветки;
• гумовий джгут для внутрішньовенних пункцій;
• суху центрифужную пробірку, на якій склографом чітко підписати прізвище пацієнтки;
• бланк - напрямок в лабораторію, де лікарем - лаборантом повторно визначається група крові, резус належність, ставиться печатка і підпис

Дотримуючись усіх правил для внутрішньовенних пункцій, зробити забір крові з вени пацієнтки (не менше 5 мл).

• Цоліклони анти-А і анти-В наносять на планшет або пластинку по одній великій краплі (0,1) під відповідними написами: анти-А і анти-В.
• Поруч з краплями антитіл наносять досліджувану кров по одній маленькій краплі (0,01 мл).
• Після змішування реагентів і крові різними скляними паличками для анти-А і анти-В в співвідношенні 1:10 за реакцією аглютинації спостерігають протягом 2,5 хв.
• Читання результатів через 5 хвилин при помішуванні крапель. (Від 3-х до 5 хвилин)
• Результат оцінюється лікарем. Оцінка результатів реакції аглютинації з Цоліклони анти-А і анти-В представлена ​​в таблиці, в яку також включені результати визначення аглютинінів сироватці (плазмі) донорів за допомогою стандартних еритроцитів.

З метою виключення аутоагглютінаціі, яка може спостерігатися в пуповинної крові новонароджених, у разі встановлення групи крові АВ (IV) необхідно провести контрольне дослідження: одну краплю (0,1 мл) ізотонічного розчину хлористого натрію змішати з маленькою краплею (0,01 мл) досліджуваної крові. Реакція аглютинації повинна бути відсутнім.

А.Уважно заповнити всі графи бланка - напрямки в лабораторію для визначення групи крові і резус приналежності з підписом лікаря.

В.  Доставити бланк-направлення та пробірку з кров'ю пацієнтки в лабораторію для ретельного визначення групи крові і резус приналежності пацієнтки.

Визначення резус-фактора за допомогою моноклонального реагенту (Цоліклони анти-D Супер)

На тарілку наносять велику краплю реагенту (близько 0,1 мл). Поруч поміщають маленьку краплю (0,01-0,05 мл) досліджуваної крові і змішують кров з реагентом. Реакція аглютинації починає розвиватися через 10-15 сек, чітко виражена аглютинація настає через 30-60 сек. (Резус позитивна, немає аглютинації - резус негативна). Результати реакції враховують через 3 хв.

Тарілку після змішування реагенту з кров'ю рекомендується похитувати не відразу, а через 20-30 сек, що дозволяє за цей час розвинутися більш повної крупнолепестковой аглютинації.

Експрес-визначення груп крові АВО і резус з використанням набору "Ерітротест-группокарт"

Набір "Ерітротест-группокарт" (ТОВ "Гематолог", Москва) призначений для визначення АВО і Резус (RhD) груп крові людини в лабораторних і польових умовах. Визначення проводиться в реакції прямої гемаглютинації і не вимагає ніяких допоміжних реактивів і обладнання. До складу набору входять:

• картка "Ерітротест-группокарт";
• піпетка з дозованим обсягом краплі близько 0,02 мл;
• стерильно упакований скарифікатор;
• паличка для змішування крові з реагентом.

У лунках картки знаходяться висушені моноклональні реагенти анти-А, анти-В, анти-АВ і анти-D, які негайно розчиняються при додаванні води. Моноклональні анти-D-антитіла специфічно виявляють антиген RhD незалежно від групи АВО. В останній лунці знаходиться розчинник для постановки контролю на неспецифічну аутоагглютінація.

Хід визначення:

Визначення проводять в нативної крові з консервантом, в крові без консерванту або крові, взятої з пальця.

• Розкривають упаковку і дістають картку, що не торкаючись до лунок з робочою поверхнею. Вписують дані пацієнта, крім групи крові.
• У кожну лунку вносять 1 краплю води (водопровідної або дистильованої), використовуючи вкладену в набір піпетку. Воду наносять на пляму висушеного реагенту. Не можна допускати підсихання краплі.
• Вносять в кожну лунку маленьку краплю досліджуваної крові. Кров наносять поруч з краплею реагенту, не торкаючись його, щоб уникнути забруднення одного реагенту іншим. Для взяття крові з пальця використовують стерильний скарифікатор.
• Ретельно змішують кров з реагентом за допомогою палички, вкладеної в набір. У кожній лунці змішування виробляють тільки нової паличкою. Використання однієї палички для перемішування в різних ланках не припустимо, т. К. Веде до забруднення реагентів і помилкового визначення групи крові.
• Відразу похитують пластинку. Чітка аглютинація настає через 10-30 с, однак остаточний результат слід враховувати через 3 хв, тому що в разі слабких форм антигену А реакція настає пізніше, а агглютінати дрібніше.
• Результат оцінюють візуально (табл. 18.6). В квадрати під кожною лункою вписують результат реакції з відповідним реагентом (+ або -).

  Таблиця 18.6. Результати реакції в наборі "Ерітротест-группокарт" і група крові
  Анти-А	Анти-В	Анти-АВ	Анти-О	Група крові
  -	-	-	-	0 (I) Rh - негативні.
  -	-	-	+	0 (I) Rh - полож.
  +	-	+	-	А (II) Rh - негативні.
  +	-	+	+	А (II) Rh - полож.
  -	+	+	-	В (III) Rh - негативні.
  -	+	+	+	В (III) Rh - полож.
  +	+	+	-	АВ (IV) Rh - негативні.
  +	+	+	+	АВ (IV) Rh - полож.

• Вписують групу крові. Висновок про групу крові можна робити тільки в разі відсутності реакції в контролі (остання лунка).
• Відрізають по лінії лунки з кров'ю, а картку зберігають.

Термін зберігання набору "Ерітротест-группокарт" - 2 роки при температурі 2- 8 ° С. Допускається зберігання протягом 1 року без холодильника, якщо температура не перевищує 25 ° С. Зберігання та використання незапаянних або пошкоджених пакетів не допускається.